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除臭菌株對NH3和H2S釋放及物質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響

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除臭菌株對NH3和H2S釋放及物質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響

引言
  
  黑龍江是畜牧業(yè)大省,隨著奶牛業(yè)迅速發(fā)展,牛糞已成為農(nóng)村的主要污染,若處理不當,將對大氣、水源和土壤造成嚴重污染,影響畜牧業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展[1, 2,3]。堆肥是利用微生物在一定的溫度、濕度和pH 值條件下,對有機物分解、轉(zhuǎn)化使之達到減量化、腐殖化和無害化,是畜禽糞便資源化利用的有效途徑,同時畜禽糞便含有豐富的N、P、K 等營養(yǎng)元素,是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中良好的有機肥源[3,4]。
  畜禽糞便在高溫堆肥過程中會產(chǎn)生大量有害氣體,其中NH3 和H2S 是最主要的惡臭物質(zhì),這些氣體不但污染環(huán)境,還對人類健康造成極大威脅。因此,采取有效措施,最大限度地降低有害氣體的產(chǎn)生和排放,使其轉(zhuǎn)化成可利用的物質(zhì),是畜禽糞便無害化處理亟待解決的問題。
  堆肥時加入選育的除臭菌株,研究對NH3 和H2S 有害氣體釋放量的影響,揭示氮和硫轉(zhuǎn)化,為畜禽糞便無害化處理及資源化利用提供理論依據(jù)及菌種資源。
  
  1 材料與方法
  
  1.1 試驗材料
  新鮮牛糞、稻草取自香坊農(nóng)場,所用菌株均為本實驗室篩選。
  
  1.2 試驗方法
  新鮮牛糞和稻草混合均勻后接入5%菌液,含水量調(diào)至65%左右,堆成2m×1.5 m×1.2m的堆體。每一個菌株設(shè)二個處理,處理Ⅰ:堆體瓶內(nèi)放置裝有硼酸溶液的燒杯,用以吸收NH3;處理Ⅱ:堆體瓶內(nèi)放置裝有鋅銨絡(luò)鹽溶液的燒杯,用以吸收H2S,以不接種菌劑為對照,每個處理重復3 次。
  
  1.3 測定項目及方法
  NH3 采用酸堿滴定法[5];H2S 采用鋅銨絡(luò)鹽吸收比色法[6];水分含量采用重量法[7];pH 值用pH 計測定[7];全氮采用硫酸-過氧化氫消煮和凱氏定氮法測定[7];有機氮采用Bremner 法[8];NH4+-N采用2mol·L-1KCl 浸提法[9];NO3-N 采用還原蒸餾法[9];硫酸鹽用EDTA 間接絡(luò)合滴定法[9];總硫采用灼燒法測定[10]。
  
  1.4 數(shù)據(jù)分析
  采用 EXCEL2003 和SPSS17.0 進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。
  
  2 結(jié)果與分析
  
  2.1 不同菌株對臭味氣體釋放量的影響
  2.1.1 不同菌株對 NH3 釋放量的影響
  堆肥初期隨著溫度上升,大量有機物質(zhì)分解,轉(zhuǎn)化成NH4+-N,進一步轉(zhuǎn)化為NH3,所有處理NH3 釋放量迅速增加,并在第7d 達到最高,隨著溫度逐漸下降及微生物礦化作用減弱,有機態(tài)氮降解為NH4+-N 量減少,NH3 釋放量也隨之下降。因此,升溫期與高溫期是調(diào)控NH3 釋放的關(guān)鍵時期。
  NH3 釋放量變化見圖1,不同菌株在堆肥過程一直有NH3 釋放,對照NH3 釋放量一直較菌株處理高,釋放高峰期均出現(xiàn)在高溫階段。堆肥結(jié)束時對照NH3 總釋放量為1.892 g/kg干樣,菌株B1、A1 與A2 為0.594、0.738 和0.870g/kg 干樣;菌株B1、A1 與A2 除氨效果較好,較對照分別降低了68.59%、61.00%和54.01%。
  2.1.2 不同菌株對 H2S 釋放量的影響
  隨著堆肥時間延長及溫度上升,易分解有機物質(zhì)快速分解產(chǎn)生大量的含硫化合物,H2S釋放量逐漸上升,第7d 時H2S 釋放量最高,隨后下降。新鮮牛糞H2S 的大量釋放主要在高溫期。因此,需要在堆肥前期與高溫期控制H2S 釋放。
  單菌株對降低 H2S 釋放均有一定的抑制作用見圖2,但存在一定差異,除菌株B3 外其他菌株在第12d 時已基本無H2S 釋放,而對照一直有H2S 釋放,并且各時期均較單菌株高,堆肥結(jié)束時H2S 釋放總量為260.84 mg/kg 干樣,菌株B1、A1 與B3 為26.89 、34.22 和 51.47mg/kg 干樣;單菌株較對照H2S 釋放量均降低了50%以上,菌株B1、A1 與B3 降低了89.69%、86.88%和80.27%,表明有很強的除臭能力。
  
  2.2 溫度對氣體釋放量的影響
  相關(guān)分析表明,溫度與NH3 和H2S 釋放量之間呈極顯著的正相關(guān)(r2=0.928),即溫度越高,氣體釋放量越多,反之,則越少。因此應(yīng)在滿足堆肥無害化前提條件下盡可能縮短高溫期維持的天數(shù),減少NH3 和H2S 的釋放,有效地保留氮素和硫素,提高堆肥產(chǎn)品品質(zhì)。
  不同菌株處理與對照間氣體釋放量均呈顯著差異(P<0.05),表明選育的菌株能在高溫堆肥時發(fā)揮作用,有效地控制氣體釋放,抑制臭味產(chǎn)生。
  
  2.3 不同菌株對物質(zhì)轉(zhuǎn)化影響
  2.3.1 不同菌株對含氮物質(zhì)轉(zhuǎn)化影響
 。1)NH4+-N 與NO3-N 變化堆肥結(jié)束時 NH4+-N 含量均比堆肥前略有提高,pH 值上升,說明有機氮礦化為NH4+-N 的速率大于NH4+-N 向其它形態(tài)轉(zhuǎn)化的速率。堆肥結(jié)束時對照NH4+-N 含量較堆肥前增加了28.44%,而除臭效果好的B1、A1 與A2 菌株僅增加了4.47%,7.19%和10.35%,NH4+-N含量較對照低是由于NH4+-N 進一步轉(zhuǎn)化為NO3-N 或被微生物吸收利用,說明添加微生物可以更好的保留氮素;NH4+-N 含量低,pH 值較小,可以減少NH3 在堿性條件下?lián)]發(fā)。
  初期反硝化作用較強,部分NO3-N 通過反硝化作用轉(zhuǎn)化成N2 或被微生物固定,各處理NO3-N 含量均比堆肥前略有下降;菌株B1、A1 與A2 NO3-N 含量比對照略有提高但變化幅度相對較小,原因是降溫期時間較短硝化細菌數(shù)量較少、硝化作用較弱。
 。2)全氮與有機氮變化隨著溫度升高,有機氮在微生物的作用下礦化為NH4+-N,一部分被轉(zhuǎn)化為NO3-N和NH3,NH3 揮發(fā)導致全氮降低;一部分被微生物利用合成細胞中的有機氮。
  由可知,不同處理全氮、有機氮含量較堆肥前均有下降。堆肥結(jié)束時菌株B1、A1與A2較對照全氮增加了19.81%、18.80%和18.20%,有機氮增加了28.99%、27.42%和25.45%;對照全氮和有機氮較堆肥前減少了5.73 g/kg 和5.01 g/kg?梢,除臭菌株可以促NH4+-N 向有機氮和NO3-N 轉(zhuǎn)化, 有效控制NH3 揮發(fā),減少氮素大量損失,防止惡臭擴散。
  2.3.2 不同菌株對含硫物質(zhì)轉(zhuǎn)化影響
  目前,國內(nèi)對高溫堆肥中H2S 物質(zhì)轉(zhuǎn)化研究未見報道。堆肥時釋放的H2S 被自養(yǎng)微生物作為營養(yǎng)物質(zhì)和能源吸收、利用,在生物體內(nèi)經(jīng)生化反應(yīng)最終轉(zhuǎn)化為硫酸鹽以及單質(zhì)硫[11]。
  表明所有處理的全硫含量均有所減少,硫酸鹽含量均較堆肥前有明顯提高,H2S 總釋放量越低其硫酸鹽含量越高,原因是有機硫化物氧化過程中釋放的H2S 被硫化細菌氧化為硫酸鹽。堆肥結(jié)束時菌株A1、B1 和B3 全硫含量較對照增加了29.05%、22.64%和17.91%,硫酸鹽含量增加了40.77%、36.49%和30.18%;對照全硫較堆肥前減少了2.64g/kg。含硫惡臭氣體作為營養(yǎng)物質(zhì)被微生物轉(zhuǎn)化為硫酸鹽,保留硫素同時達到了去除惡臭的目的。
  
  2.4 養(yǎng)分損失與形態(tài)轉(zhuǎn)化
  2.4.1 氮素損失與形態(tài)轉(zhuǎn)化的關(guān)系
  堆肥過程中氮素形態(tài)間的轉(zhuǎn)化主要包括兩個方面:氮素的固定和釋放。通常在堆肥過程中,氮素有一定的損失,這主要是由于有機氮的礦化和持續(xù)性NH3 的揮發(fā)以及NO3-N 的可能反硝化作用所導致[12]。
  畜禽糞便中含有的氮類物質(zhì),主要為NH4+-N、NO3-N 和有機氮。隨著微生物快速生長和繁殖,有機氮礦化為NH4+-N,部分NH4+-N 進一步轉(zhuǎn)化為NO3-N 和有機氮,未被轉(zhuǎn)化的NH4+-N 在堿性條件下以NH3 的形式揮發(fā),pH 較高時,不僅造成堆肥的氮素損失,也是惡臭產(chǎn)生的主要因素。
  相關(guān)性分析見,NH3 釋放量與H2S 釋放量、pH 呈極顯著正相關(guān),與全氮、有機氮和硫酸鹽變化趨勢則相反;pH 與NH4+-N 呈極顯著正相關(guān),與全氮、有機氮、NO3-N 和硫酸鹽的變化趨勢則相反。表明有機氮礦化為NH4+-N 含量越高,pH 值越高,NH3 釋放越多;NH4+-N 轉(zhuǎn)化為NO3-N、有機氮含量越多,全氮含量也越高,NH3 揮發(fā)則越少,表明選育的菌株能夠有效調(diào)控氮素轉(zhuǎn)化,達到控制臭味和提高氮素的目的。有機硫化物主要以含硫氨基酸和硫胺素、生物素等形態(tài)存在,而一般蛋白質(zhì)的氨化過程伴隨有脫硫過程[13],因此微生物在降解蛋白質(zhì)等化合物產(chǎn)生NH3 的同時也會生成H2S,表明NH3 與H2S 揮發(fā)是正相關(guān)的,與一些學者研究結(jié)果一致。因此降低物料pH 值、促進NH4+-N 向其它形態(tài)氮轉(zhuǎn)化是控制NH3 揮發(fā)的有效途徑。
  2.4.2 硫素損失與形態(tài)轉(zhuǎn)化
  堆肥過程中硫素形態(tài)間轉(zhuǎn)化是一個復雜的過程,硫素主要以元素硫、硫化物、硫酸鹽、亞硫酸鹽和有機硫等形式存在。在堆肥過程中,隨著溫度升高,含硫有機化合物在異養(yǎng)微生物作用下分解生成含硫氣體,是堆肥中硫素損失和臭味產(chǎn)生的主要原因。
  相關(guān)性分析見表2-1,H2S 釋放量與pH 呈顯著正相關(guān),與全硫、全氮和硫酸鹽變化趨勢則相反。表明含硫有機化合物被異養(yǎng)微生物分解生成H2S 部分揮發(fā)到空氣中,部分被異養(yǎng)微生物轉(zhuǎn)化為硫酸鹽,轉(zhuǎn)化的越多,全硫減少的越少,H2S 釋放越少;NH3 與H2S 揮發(fā)是顯著正相關(guān),而NH3 揮發(fā)越多全氮含量越少,因此,全氮含量越高,H2S 釋放越少。表明選育的除臭菌株可以調(diào)控硫素轉(zhuǎn)化,減少含硫有機化合物分解和H2S 揮發(fā),控制臭味產(chǎn)生保留更多的硫素。
  堆肥過程中 NH3 釋放量較H2S 多、且周期長;H2S 溶于水呈酸性, pH 值越高溶解越多,釋放越少,而NH3 溶于水呈堿性, pH 值越低溶解越多,釋放越少[14],表明高pH 對NH3 釋放影響較H2S 大,而堆肥過程中pH 一直較高,因此pH 與NH3 釋放量呈極顯著正相關(guān),而與H2S 釋放量呈顯著正相關(guān),表明選育的菌株能在較寬的pH 范圍控制NH3 釋放。
  
  3 結(jié)論
  
 。1)牛糞堆肥加入選育的菌株均有較強的除臭效果,菌株B1 與A1 除臭效果最好,對NH3 與H2S 去除率分別能達到60%與80%以上,有效地控制NH3 與H2S 揮發(fā)。
  (2)近幾年來有關(guān)堆肥中氮素損失及氮素轉(zhuǎn)化已有文獻報道,但目前有關(guān)硫素轉(zhuǎn)化的研究未見報道,本文對硫素轉(zhuǎn)化進行了初探。
 。3)測定堆肥前后原料養(yǎng)分含量變化,研究了NH3 與H2S 物質(zhì)轉(zhuǎn)化。菌株B1、A1 可以促使氮類物質(zhì)向有機氮和NO3--N 轉(zhuǎn)化,同時可以降低H2S 釋放,促使其向硫酸鹽類轉(zhuǎn)化,有效地保留了氮素和硫素。
 。4)溫度與氣體釋放量之間呈極顯著的正相關(guān),不同菌株處理與對照間氣體釋放量均有顯著差異(P<0.05),表明選育的菌株能在高溫下有效地控制氣體釋放。
 。5)NH3 與H2S 揮發(fā)呈顯著正相關(guān),pH 對NH3 釋放的影響比對H2S 釋放的影響顯著。
  (6)相關(guān)性分析表明,有機氮被微生物礦化為NH4+-N 含量越高,pH 值越高,NH3 釋放越多,而NH4+-N 被微生物轉(zhuǎn)化為NO3-N、有機氮含量越多,NH3 揮發(fā)越少;有機硫化物被微生物大量分解生成的H2S 越少,而H2S 轉(zhuǎn)化為硫酸鹽的含量越多,硫素損失的越少。

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